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3000字论文范

时间:2016-11-10 09:39:06 来源:免费论文网

篇一:当代大学生使命与“中国梦”3000字论文

2012-2013学年第二学期形势与政策课程

期末考试论文

论文题目

系 部

专 业

学 号 20122316

姓 名

完成时间2013.06.12

成 绩

评阅教师

中国梦 ,青年梦经济管理系 会计学 华杨

中国梦,青年梦

【摘 要】:2012年11月29日,新一届中央领导集体走进国家博物馆,参观《复兴之路》展览。这是在十八届一中全会上和中外记者见面之后,新班子的又一次集体亮相。再次亮相,重温历史。回首百年,感慨良多。参观过程中,中共中央总书记、中央军委主席习近平发表了重要讲话。阐述了引发广泛共鸣的“中国梦”话题。作为新时代的大学生,每个人都有理想和追求,都有自己的梦想。现在,大家都在讨论中国梦,实现中华民族伟大复兴,是中华民族近代以来最伟大的梦想。这个梦想,凝聚了几代中国人的夙愿,体现了中华民族和中国人民的整体利益,是每一个中华儿女共同的期盼。那么,青年人的梦想与国家的梦想又有着怎样的交集?我们这群饱含爱国之情的大学生青年们,要怎样的为早日实现中国梦而做出贡献?历史告诉我们,每个人的前途命运都与国家和民族的前途命运紧密相连。国家好,民族好,大家才会好。实现中华民族伟大复兴是一项光荣而艰巨的事业,需要一代又一代中国人共同为之努力。

【关键词】:中国梦;青年大学生;中华民族的伟大复兴;实现梦想

一:实现中华民族伟大复兴,是中华民族近代以来最伟大的梦想。这个梦想,始于一段屈辱的历史,凝聚了几代中国人的夙愿,是每一个中华儿女共同的期盼。

(一)说到实现中华民族的伟大复兴,我的心中总是不由自主涌起一阵心酸与豪情:【1】?中华民族有着悠久灿烂的文明,长期居于世界文明发展的先进行列。据有关学者测算,直到18世纪末期,中国的经济规模仍是世界上最大的,相当于上个世纪末期美国经济总量在世界经济总量中的比重。长期以来,中华文明以其独有的特色和辉煌走在了世界文明发展的前列,为世界文明进步作出过巨大的贡献。然而,随着资本主义生产方式的兴起,随着近代工业革命脚步的加快,中国很快落伍了。固步自封的封建统治者仍然沉浸在往日的辉煌所造就的梦想之中,等待着?万国来仪?。不料,等来的却是西方列强的船坚炮利,等来的却是亡国灭顶之灾,在西方坚船利炮的侵略下,中华民族遭受了深重苦难、付出了重大牺牲,辉煌不再,尊严难立,中华儿女也从此开始了百年?中国梦?的辛苦求索、艰难追寻。?是啊,回想起那段屈辱的历史,心中免不了一份沉重。但更是多了一份豪情,一份期盼,一定要改变这一切!一定要实现中华民族族的伟大复兴。

(二)当我们对国外的博物馆声称他们陈列的十二生肖铜像是我们中国的时候,他们总会嘲讽的说:?哈哈!等你们成为世界第一强国再说这句话吧,到时比较有用。现在年年都说,又有什么用,欧美和日本的博物馆里,还不时照样放满了中国的古董。不过,我可不认为你们中国会再次变强,唐朝的天朝上国已经一去不复返了,现在你们中国人只是一群寄生在先祖伟大事迹上的寄生虫而已!?然而,中国是不会完的,总有一天会再次雄起,因为这个国家不光有贪官,在平民之中还有真正的爱国者,是那些正在被贪官剥削的个体户,是那些正在被房价压榨的工人,是那些辛劳一生也得不到任何保障的农民……迟早有一天,他们会成为国家的主导,让中国真正的踏上富强之路。他们这些资本主义的渣子,是不会明白的。他们不会明白,中国梦,是中华儿女普遍的坚定的思想意识和目标追

求。中国梦经历了近代以来中华民追问的锤炼,经历了民族沦为半殖民地半封建社会而遭受空前屈辱和磨难的洗礼,经历了无数志士仁人肝脑涂地和舍命抗争的无数次劝谕的启迪,经历了千万次中国向何处去的上下求索和反复。从新中国成立之日起,我们正在为实现?中国梦?经历着第二个一百年。在这第二个一百年,我们经历过近30年的建设、探索与曲折,以党的十一届三中全会为起点,走上了中国特色社会主义康庄大道。在我们的前面,还有36年的新征程,将要达到两个一百年的奋斗目标,即在中国共产党成立一百年时全面建成小康社会,在新中国成立一百年时建成富强民主文明和谐的社会主义现代化国家。基于此,在充满希望的未来,我们必将实现中华民族的伟大复兴。

二:用青年梦托起中国梦,中国梦是国家的梦,是民族的梦,是人民的梦,更是青年人的梦。让两个梦一起飞翔!

(一):古代先贤曾经写下这样的诗篇:【2】?制出将来之少年中国者,则中国少年之责任也。使举国之少年而果为少年也,则吾中国为未来之国,其进步未可量也。使举国之少年而亦为老大也,则吾中国为过去之国,其渐亡可翘足而待也。故今日之责任,不在他人,而全在我少年。少年智则国智,少年富则国富,少年强则国强,少年独立则国独立,少年自由则国自由,少年进步则国进步,少年胜于欧洲,则国胜于欧洲,少年雄于地球,则国雄于地球? 青年是中国梦的寄托者。青年是祖国的未来、民族的希望,是党和人民事业发展朝气蓬勃的推动力量。看当代青年,思想主流积极、健康、向上,他们热爱党,热爱祖国,热爱人民,坚决拥护党的路线方针政策,忠实践行科学发展观,对坚持走中国特色社会主义道路、实现全面建成小康社会的宏伟目标充满信心,作为中国梦的寄托者,当之无愧!青年是中国梦的助跑者。青年兴则国兴,青年强则国强。当代青年正处在实现中国梦的年富力强时期,我们可以看到无数次的科技创新活动镌刻着青年人的身影;成千上万支青年社会实践队伍活跃在田间地头,他们躬身践行,获取真知;数十万青年激扬文字、干事创业,引领社会潮流、成就行业标杆;一张张朝气蓬勃的脸庞上,洋溢着令人欣慰、充满希望的精气神,他们正在用自己的实际行动托起中国梦。青年是中国梦的成就者。实现中华民族伟大复兴,是一个长期艰苦奋斗的历史过程。青年朋友一定要树立崇高的理想和信念,坚定中国特色社会主义的道路自信、理论自信、制度自信,将个人梦和中国梦相结合,先天下之忧而忧,担负起自己的使命与责任;一定要刻苦学习、全面发展,把创新精神同科学态度结合起来,把仰望星空与脚踏实地结合起来,不断增强民族文化认同感,切实掌握现代文明和技术成果;一定要自觉地到祖国最需要的地方去,到条件艰苦的地方去,在改革开放和现代化建设的伟大实践中经风雨、见世面、长才干,为实现中华民族的伟大复兴贡献自己的青春、智慧和力量!

(二):中国梦,这是一个集体概念,并不特指单个人的利益和价值,而是大家共同的目标和价值追求。中国梦不能脱离单个个体而存在,它依靠那些有着梦想和实干精神的青年人发挥主力军的作用。国家之梦,反映国民之梦;个人之梦,融为民族之梦。当今中国,国家理念与人民期盼同声相应;个人梦想与民族 梦想一脉相承,中国梦既是?强国梦?,也是?富民梦?。 青年是最容易盛产梦想的花季,也是最有条件把梦想付诸实践的时期。青年梦既是个人梦,也是强国

梦。中华民族是一个充满着朝气的民族,新时期的中国是我们实现梦想的时代, 所以年轻人的梦想与国家民族兴衰荣辱紧密相连,要勇敢追求自己心中的梦想, 并付诸行动,为实现?中国梦?增添新的活力,每一个中国人需要把个人的梦想和‘中国梦’结合起来,把个人的梦想融入到‘中国梦’中去,作为青年更应如此。首先,我们应认真学习科学文化知识,树立正确的人生观、世界观、价值观。作为当代大学生,要鼓足中国信心,努力通过自身的学习实践活动锻炼增强本领,学好专业知识,带领同学们在实践中实现自我人生价值,其次,勇于创新,在创新中发展。时代在变迁,社会在进步,陈旧的思想已经适应不了只要广大青年胸怀理想,只有创新才能实现我们的梦想,最终实现民族复兴。明确个人目标,以?天行健,君子以自强不息?来作为自己的座右铭,成就自身价值。只要广大青年胸怀理想,满怀激情,敢于担当,敢于创造,用‘两个百年’的目标激励自己顽强奋斗、艰苦奋斗、不懈奋斗,奋勇投身中国特色社会主义事业伟大实践,才能为实现‘中国梦’发挥生力军作用,用‘青年梦’托起‘中国梦,最后,我们要有扎实端正的的学习生活态度、工作作风。习近平总书记多次强调:?空谈只会误国,实干才能兴邦?。【3】“青年是最容易盛产梦想的花季,也是最有条件把梦想付诸实践的时期,同时也是推进社会进步的伟大力量,最具创新热情和创造潜力,但是要用这种热情和潜力真正成就一番事业,必须依靠脚踏实地的实干精神。?最后,我想说:?只有拥有自己梦想的青年,才会不断的进步;只有创造了灿烂文明的民族,才会如此渴望再创辉煌;也只有历尽苦难沧桑的国家,才更珍惜来之不易的道路。沿着这条复兴之路,为梦想努力奋斗,让梦想照进现实,我们的目标一定要达到,我们的目标一定能够达到。

中国梦,我们曾经离它如此之远,我们从未离它如此之近。

参考文献

【1】“中国梦”:内涵·路径·保障[N]。人民日报,2013-03-04(04).

【2】梁启超,少年中国说[A].

【3】冯克利。邓小平时代[M].香港中文大学出版社,1991.19、113-113.

篇二:毛概论文3000字标准范文

论毛泽东的创新思想及其特点【摘要】创新思想是毛泽东构建其思想理论的重要手段,体现在毛泽东关心、思考和研究的各个领域,是贯穿毛泽东思想体系的主线。本文介绍了毛泽东思想创新的必要性;概述了毛泽东创新思想在各个方面的主要成果;分析了毛泽东创新思想具有的特色。

【关键词】毛泽东思想;创新思想;特点;创新型国家

毛泽东作为马列主义同中国实际相结合的第一次历史性飞跃产生的理论成果——毛泽东思想的主要创立者,在其数十年革命的生涯中,之所以能成功地把马列主义普遍原理同中国实际相结合,创造性地开辟新民主主义革命道路和社会主义改造道路,提出了一系列关于中国革命和建设的具有独创性的思想理论,这来源于他不竭的创新动力。

一、毛泽东对理论创新必要性的论述

中国共产党建党之初,便确立了马克思主义为党的指导思想。但是,马克思主义对中国国情、中国革命的性质和任务、中国革命发展规律和道路却没有现成的具体答案。中国革命的实践表明,任何照搬照抄经典著作,照搬照抄外国经验的做法,都有可能导致革命的失败。作为中国共产党内最具独立思考品质的领导人,毛泽东向当时盛行的教条主义进行了勇敢的挑战,在中共党内率先提出了马克思主义必须与中国革命实践相结合,并要大胆进行理论创新的原则。

毛泽东论述了理论结合实际和理论创新的必要性,他认为要把马、恩、列、斯的方法用到中国来,在中国创造出一些新的东西。只有一般的理论,不用于中国的实际,打不得敌人。但如果把理论用到实际上去,用马克思主义的立场、方法来解决中国问题,创造些新的东西,这样就用得了1。中国共产党人只有在他们善于应用马克思列宁主义的立场、观点和方法,善于应用列宁斯大林关于中国革命的学说,进一步从中国的历史实际和革命实际的认真研究中,在各方面作出1

合乎中国需要的理论性创造,才叫做理论和实际相结合2。1960年,毛泽东又进一步阐发了这个原则,他指出马克思、恩格斯、列宁的书,必须读,这是第一。但是任何国家的共产党人,任何国家的无产阶级思想界,都要创造新的理论,写出新的著作,产生自己的理论家,来为当前的政治服务。任何国家,任何时候,单靠老东西是不行的。现在我们已经进入了社会主义时代,出现了新的一系列的问题,如果不适应新的需要,写出新的著作,形成新的理论,也是不行的。

毛泽东再三地论述这个问题,是要阐述干革命进行理论创新的必要性和客观必然性。它的含义有以下三点:

1.马克思主义的生命力在于理论与各国实践相结合,倘若固守僵死的教条,就只能给各国革命带来危害。

2.理论与实践相结合的一个重要内容,就是要在实践中进行合乎本国实际的理论创造。

3.随着革命形势的发展,马克思主义也要发展。革命党人必须顺应新形势发展的需要,不断创造出指导革命的新理论来。

毛泽东关于理论创新的论述,完全符合马克思主义的基本实践精神。他与其他的共产党人一道,坚持这个原则,开创了马克思主义中国化的新局面,毛泽东思想就是理论创新的产物,他本人则通过勤奋的读书学习,理论联系实际,大胆提出新的科学论断和理论观点,成为一个创造性的马克思主义理论家。

二、毛泽东创新思想的主要体现

毛泽东创新思想的内容极为丰富,无论在理论上或在实践上,都有重要突破,结出了丰硕成果,主要体现在以下五个方面。

(一)在新民主主义革命和社会主义革命方面

毛泽东认为马列主义是规定了世界革命的基本原则,但中国革命的具体做法要我们在实践中创造。毛泽东和党的其他领袖一道,以切实的中国国情为依据,提出了一条崭新的民主革命总路线,开创了一条具有中国特色的民主革命道路。他指出分清敌友是革命的首要问题,工人阶级是革命的领导阶级,农民阶级、城市小资产阶级和民族资产阶级是革命的主力军和同盟军,这不同于俄国革命主要依靠工人阶级,将整个资产阶级作为革命的对象。他认为在半封建半殖民地的中2

国,革命应分两步走,首先完成无产阶级领导下的反帝反封建的民主革命,再进一步推进到社会主义,而不是像俄国革命那样直接进行社会主义革命。

这些理论,都是马列主义原理与中国革命实际相结合的创新,是前人书本上没有的,也是外国经验搬不来的。它成功地推进了中国的民主革命,这是对科学社会主义学说的重大发展,为殖民地半殖民地国家的无产阶级革命提供了新的经验和成功范例。

(二)在社会主义建设方面

我国进入社会主义时期后,提出进行适合中国国情的社会主义建设道路的探索。他在一个关于总结经验的指示中提出:“我们不能走世界各国技术发展的老路,跟在别人后面一步一步地爬行,我们必须打破常规,尽量采用先进技术,在一个不太长的历史时期内,把我国建设成为一个社会主义现代化的强国。”

结合中国实际,打破常规,大胆探索创新,毛泽东在几十年前已经提出了在经济建设中进行科技创新的设想。

(三)在军事战略战术方面

毛泽东反对战争问题上的机械论,主张从战争情况、时间条件、战争性质、地域条件、民族战争的指导规律的不同着眼,根据自己的特点,灵活应用,大胆创新。他的这一思想成为他确立灵活机动战略战术和人民战争战略思想的基础,创造性地确立了游击战和带游击性的运动战是中国革命战争较长时期内的主要作战形式,提出了在敌强我弱的形势下实行战略的持久战和战役、战斗的速决战,把战略上的劣势转变为战役、战斗上的优势,集中优势兵力,各个歼灭敌人等一系列人民战争的战略战术。

(四)向外国学习方面

毛泽东首先充分肯定了向外国学习的重要性和必要性,认为每个民族都有它的长处,我们应该向他们的长处学习。他又说:“必须有分析有批判地学,不能盲目地学,不能一切照抄,机械搬运。他们的短处,当然不要学。3”学习应与独创相结合,创新是学习的出发点和归宿。

(五)在教育方面

毛泽东提出了要以学生是否有创新见解作为教育评价体系主要标准的重要3

命题。他还鼓励学生不要受考试分数的束缚,要大胆主动地学,要把精力集中在培养分析问题和解决问题的能力上,不要只是跟在教员后面跑,自己没有主动性4。他的这些鼓励创新,有益创新的教育思想,对我们今天所开展的以培养学生创新能力为核心的教育教学改革,仍有现实指导意义。

三、毛泽东创新思想的特点

综观毛泽东的创新思想,可以发现有如下五个主要特点:

(一)创新与怀疑批判精神相结合

毛泽东从青少年起即具有怀疑与叛逆的思想和品格,成为中国革命主要领导人后,他依然保持着对许多事物大胆怀疑、寻根究底的劲头。他对中国革命和建设道路的探索,都发端于对以城市为中心的道路和传统社会主义工业化模式的怀疑。建国以后的毛泽东,在各个领域都保持着不竭的怀疑习惯和批判精神。对有人问党的政策是否允许争论,他批示道:“为什么不允许争论呢?”对解放后实行脱离实际的教育教学制度,他说:“现在这种教育制度,我很怀疑。5”继而提出一系列缩短学制、减少课程、教材删繁就简、提倡启发式教学、注意理论联系实际的新颖的教育教学思想。大胆的怀疑批判精神使毛泽东能够发现一般人难以发现的问题,使他能够独辟蹊径,有所创新。

(二)创新与反对教条主义和奴隶主义相结合

毛泽东在每一个领域提出的创新观念,都几乎与批判教条主义相联系。教条主义对中国革命的危害最大,毛泽东视之为主要危险。教条主义的本质是主观与客观相分离,其主要表现为思想上形成一种束缚,马列的本本没说过,革命前驱者没做过,就不敢说也不敢做。用教条主义的方法指导中国革命和建设,势必是照搬照抄外国经验和书本上的条条,拒绝马列主义与中国革命实际相结合,顽固保守,不敢也不许创新和突破。

(三)创新与独立思考相结合

独立思考也是创新的极其重要的必备条件,它为创新提供思路、观点、理论方法和达到目的的路径。一个人能够有所创新,他必然是善于独立思考的人。毛泽东就是一个最具独立思考品格的理论家和实践家。他不迷信书本,不盲从权威,不崇拜偶像,对一切事物和现成理论保持不随波逐流,坚持不人云亦云地进行个4

5 《伟大的毛泽东思想万岁》 第137页

人独立思考和判断的态度。

毛泽东反复要求全党在读书、领导革命和建设的时候,切记要独立思考,要加以分析确定哪些是正确的,哪些是不正确的,想一想是否合乎实际,是否真有道理。绝对不应盲从,绝对不应提倡奴隶主义。毛泽东明确表示:“一个人有对有不对,对就跟,不对就不跟,不要糊里糊涂地跟”“糊里糊涂跟某人走很危险,要独立思考。”6毛泽东对独立思考的强调,为我们明确了通向真理和创新的正确途径。

(四)创新与实事求是相结合

毛泽东的创新理论和实践表明,创新的立足点是中国革命和建设的客观实际,创新的目的在于解决中国革命和建设中的实际问题,创新正确与错误的检验标准是千百万中国人民的实践。也就是说,毛泽东的创新是与实事求是精神紧密结合的。

毛泽东在民主革命时期就指出:“真理只有一个,而究竟谁发现了真理,不依靠主观的夸张,而依靠客观实践。只有千百万人民的革命实践,才是检验真理的尺度。7”毛泽东思想是一种正确的创造性的马克思主义理论,是因为这种思想指导中国革命获得了成功,推进了建设事业的发展,产生了有益于中国社会进步的实际效果。

(五)创新与调查研究相结合

毛泽东创新精神的思维方式,不仅强调从实际出发,而且十分重视对问题的思考与下结论必须建立在调查研究基础上,把调查研究看作是认识事物、思考问题、解决问题、做好工作的前提与基础以调查研究作为认识事物、解决问题的实践基础,是毛泽东创新思维的重要特征,他的许多创新思想均源于此。

毛泽东有句名言:“没有调查,没有发言权。”他还说,“调查就是解决问题。”他一生做了大量调查研究,这不仅为他的创新活动提供了实践环境,而且为他的创新思想提供了大量实际资料。

调查研究为毛泽东的创新思维铺实了基础,也避免了认识上的主观主义和经验主义。正因为有了建立在客观实际基础上的认识,所以毛泽东能够精辟地提出许多独创性的思想理论。 6

7 毛泽东 《1958年在成都会议上的讲话》

篇三:3000字论文摘要范本

交联于蛋膜上的纳米颗粒增强的尿酸酶传感器

陈燕花

化工与资源环境学院 化学工程与工艺专业

指导教师:伍 林

1前言

随着生命科学的发展进入分子水平,有人预言21世纪将是检验医学的世纪,即从分子水平对疾病进行诊断和治疗。这就要求临床生物化学检验准确、快速、简便、标本微量化、方法标准化、且经济实用。生物传感器正是在此要求下出现的一类跨领域、多学科的前沿诊断仪器。

国内外对生物传感器展开了广泛深入地研究,已经研制出了葡萄糖生物传感器、乳糖生物传感器、尿酸酶生物传感器、DNA生物传感器、BOD生物传感器、测酚生物传感器等多种类别的生物传感器,来满足人们在临床检验、环境监测和生化分析[1-3]等领域中的需求。

本实验将纳米二氧化硅凝胶和尿酸酶紧贴于蛋膜上,将酶膜紧贴于普鲁士蓝(PB)修饰的玻碳电极表面,然后以自制铂片电极为对电极、甘汞电极为参比电极,组成三电极体系,制成尿酸酶生物传感器。当体液中的尿酸通过酶膜时,与酶进行反应,检测出该处产生的反应电流,然后将其换算成尿酸浓度加以显示。应用尿酸酶传感器测定人体血和尿中尿酸的浓度,是一种准确、快速、简便的方法,可帮助诊断肾炎、白血病和肿瘤等疾病。

2 尿酸酶生物传感器的工作原理

尿酸酶生物传感器的工作原理是:尿酸在尿酸酶作用下,被分子氧氧化成尿囊素,并产生二氧化碳和过氧化氢。根据反应前后氧的消耗,我们用电极监测溶液中氧的变化,就可推算出尿酸的浓度,其工作机理如图2:

[4]

图1尿酸在尿酸酶作用下的反应机理

Figure1 Principle of uric acid under the uricase

3实验部分

3.1 仪器与试剂

试剂:尿酸酶(4.6units/mg, Sigma公司),牛血清白蛋白(BR),戊二醛(CP),磷酸氢二钠,磷酸二

氢钾(AR),氯化钠(AR),鸡蛋,气透膜,实验用水为二次蒸馏水。

仪器:玻碳电极(天津兰力天仪器有限公司),铂电极(自制,铂片长×宽×厚为5×4×0.25mm),甘汞

电极(上海雷磁),CHI600型电化学工作站(上海辰华仪器有限公司)。

3.2 尿酸酶电极的制备

取新鲜鸡蛋壳小心剥离蛋膜,依次用NaCl溶液、蒸馏水清洗;称取12.5mg牛血清白蛋白(BSA)溶于250μL 10g?L尿酸酶溶液中;将蛋膜铺于洁净的玻片上,小心裁取直径为1cm的圆形膜;在膜上依次滴加25μL尿酸酶-牛血清白蛋白混合溶液、改性纳米二氧化硅凝胶液、5μL 2%戊二醛溶液,室温放置3~4h,置4℃冰箱冷藏过夜;过夜后的蛋膜用磷酸缓冲液(PBS)漂洗数次;将酶膜紧贴于PB修饰的玻碳电极表面,覆盖气透膜,即制成尿酸酶电极[5,6]。

实验流程如图2所示。

-1

图2 纳米颗粒增强的尿酸酶电极制作示意图

Figure2 Manufacture flow chart of nanoparticles strengthen uricase electrode

3.3 实验方法

采用三电极体系进行检测:饱和甘汞电极为参比电极,制作的尿酸酶电极为工作电极,自制铂片电极为对电极,底液为0.1mol ·L-1的KCl 磷酸盐缓冲溶液,在一定的温度下进行检测。测量时,先将三

电极置于缓冲溶液中,加一电压于工作电极(0.4VvsSCE),当背景电流值减小至一恒定值时,将电极放至被测尿酸溶液中,分别记录不同时间的电流响应值,扣除初始背景电流值,即为被测尿酸离子浓度的电极电流响应值。

4影响因素分析

4.1 尿酸浓度的影响

测量不同浓度尿酸的响应信号,使得电极响应与尿酸浓度成很好的线性关系,酶电极在不同浓度的尿酸中的循环伏安如图3所示。确定尿酸酶生物传感器检测尿酸浓度的线性响应范围,如图4 所示。实验测定尿酸浓度的线性响应范围为7.5×10~1.5×10mol·L。

-6-4-1

图3酶电极在不同浓度的尿酸中的循环伏安图 图4尿酸浓度与响应电流线性关系图 Fig3 Cyclic voltammograms of the uricase biosensorFig4 Linear relationship’ chart of difference of urate standard in different concentration of uric acid current response solutions on the urate biosensor

(a.112.5μg/mL, b.75μg/mL, c.37.5μg/mL, d.7.5μg/mL, e.0μg/mL)

4.2 尿酸酶浓度的影响

向尿酸溶液中多次加入尿酸酶,以测定不同浓度尿酸酶对氧化峰电流的影响。电流响应随着尿酸酶浓度从零到某浓度的增加而增加。综合考虑电流响应和经济因素,选择最适宜的尿酸酶浓度1.5U。

4.3 纳米二氧化硅的影响

酶电极的性能是由酶的催化活性、酶活性中心和导电基质之间电子交换速率决定的。纳米颗粒比表面积大、表面自由能高,吸附能力较强,把纳米颗粒引人到传感器研究中,可以使更多的酶分子可以固定在纳米颗粒表面。另外,由于纳米颗粒尺寸很小,有可能与酶内部的FAD亲水基团发生作用,从而引起酶构型上的变化。这种变化使得酶的活性中心FAD更接近底物,提高了酶的催化效率。改性纳米SiO2颗粒对生物分子具有很好的选择吸附性,可望实现纳米颗粒与酶分子活性中心及电极之间的直接电化学作用,大大增强生物传感器的灵敏度。本实验对不添加纳米二氧化硅、添加纳米二氧化硅、添加改性的纳米二氧化硅,所制备的尿酸酶生物传感器进行了比较,实验证明纳米二氧化硅有增强电流响应信号的作用。

4.4 缓冲溶液pH值的影响

缓冲溶液pH值对酶催化反应速率和酶的活性有较大影响,如图5所示。尿酸酶最适宜pH范围较宽。综合考虑酶的活性以及响应电流的最大的灵敏度,选择最适宜的pH值6.5。

图5 pH值对酶生物传感器响应信号的影响 图6 温度对酶生物传感器响应信号的影响 Fig5 Effect of pH on the current responseFig6 Cyclic voltammograms of the uricase biosensor

of the enzyne biosensorin different temperature

(a.25℃, b.20℃, c.30℃, d.35℃, e.10℃)

4.5 温度的影响

温度的变化将影响酶的活性及酶催化反应速率。在10~35℃范围内考察氧化峰电流与温度的关系,如上图图6所示。氧化峰电流随温度的升高而增大。考虑温度较高时酶易变性失活,选择最适宜的温度25℃。

4.6 工作电极的影响

将酶膜分别固定在铂电极、玻碳电极、石墨电极上,观察响应电流的灵敏度,选择最适宜的固定电极-玻碳电极进行实验。

5结论

本方法研制的尿酸酶生物传感器具有操作简单、分析速度快、灵敏度高、所需试样少的特点,通过进一步研究后,有望应用于临床,帮助诊断肾炎、白血病和肿瘤等疾病。

参 考 文 献

[1] 潘涛. 生物传感器的概述和研究进展[J]. 江苏广播电视大学学报, 2002, 6(12): 55-56.

[2] Mukhopadhya K, Phadtare S, Vinod V P, et al. Gold nanoparticles assembled on amine-functionalized Na-γzeolite: A biocompatible surface for enzyme immobilization[J]. Langmurir, 2003, 19: 3858-3863.

[3] Sbrana F, Parodim T, Ricci D, et al. Langmurir films of thiolated gold nanoparticles transferred onto functionalized substrate: 2-D local organization[J]. Material Science and engineering C, 2002, 22: 187-191.

[4] 铃木周一. 生物传感器[M]. 科学出版社, 1988.

[5] 邓健, 廖力夫, 袁亚莉, 等. 乳酸氧化酶共价交联于蛋膜上制备乳酸传感器[J]. 分析试验室, 2002, 21(6): 64-66.

[6] 邓健, 袁亚莉, 许金生, 等. 葡萄糖氧化酶共价交联于蛋膜上的葡萄糖传感器[J]. 分析化学, 1998, 26(10): 1257-1259.

Nanoparticles Strengthen Uricase Biosensor Utilizing

Covalently Bond on Egg Membrane

Chen Yan-hua

College of Chemical Engineering, Resources and Environment

Wuhan University of Science and Technology

Abstract: In the experiment, BSA(bovine serum albumin) and glutaraldehyde were taked as cross linking reagent, and nanoparticles gel and uricase were cross-linked on egg membrane. The three electrode system which composed of two platinums electrodes act as working electrode and counter electrode respectively, saturated calomel electrode acts as reference electrode, and execut uricase biosensor. The concentration of uricase, nanoparticles, pH value of solution, temperature were studied emphatically. The 1.5U uricase in pH6.5 solution at the temperature 25℃ were appropriate conditions. The linear range of the biosensor is

7.5×10-6~1.12.5×10-4μg/mL.

Keywords: uricase; egg membrane; nanoparticles; biosensor


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